Prvá katedrála Ameriky postavená v rokoch 1510 až 1540, známa ako Santa Iglesia Catedral Basílica Nuestra Señora de la Encarcación o Anunciación, Primada de América, sa dodnes týči v celej svojej kráse nad srdcom koloniálneho mesta. Táto 500-ročná budova v gotickom štýle naďalej slúži ako najdôležitejšie miesto pre oficiálne ceremónie a náboženské slávnosti. Prehliadka interiéru odhaľuje zdobený gotický strop katedrály, olejomaľby z koloniálneho obdobia, posvätné miestnosti kaplnky, ako aj priestor s náhrobnými kameňmi s pozostatkami arcibiskupov. V 19. storočí sa tu našli pozostatky Krištofa Kolumba.
